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紫外可見分光光度計的定量定性方法

更新時間:2021-09-01      點擊次數(shù):9639
  紫外可見分光光度計是一種應(yīng)用很廣的分析儀器。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個方面,用來進行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等。因為儀器涉及到光學(xué)、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等,所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用
 
  (1)定量分析
 
  根據(jù)瑯伯-比爾定律,樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的,濃度越大,吸收值越高,所以分光光度計用的還是定量分析,定量分析的種類有很多,這里介紹常用的幾種定量分析方法:
 
  A、法:法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用較多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法,某一物質(zhì)在一定波長下ε值是一個常數(shù),石英比色皿的光程是已知的,也是一個常數(shù)。因此,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,測定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。
 
  B、標(biāo)準法:在選定的波長處,在相同的測試條件下,分別測試標(biāo)準樣品溶液C標(biāo)和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。
 
  C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)
 
  C、標(biāo)準曲線法
 
  紫外可見分光光度計常用的定量分析方法是標(biāo)準曲線法。即先用標(biāo)準物質(zhì)配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準溶液。在一定波長下,測試每個標(biāo)準溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標(biāo),標(biāo)準溶液對應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準曲線。將樣品溶液按標(biāo)準曲線繪制程序測得吸光度值,在標(biāo)準曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量。
 
  A、 其它分析方法
 
  除上述幾個分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外,還有比吸收系數(shù)法、二乘法、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法。
 
  (2)定性分析
 
  如果未知物的紫外吸收光譜的吸收峰波長λmax、吸收峰波長λmin、摩爾吸光系數(shù)εmax,以及吸收峰的數(shù)目、位置、拐點與標(biāo)準光譜數(shù)據(jù)*一致,就可以認為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì)。
 
  定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,特別是定量分析。其它的分析都應(yīng)該是從這兩大種功能中發(fā)展出來的。
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